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步琦实验室设备贸易(上海)有限公司 2024-01-29 点击233次
从猫爪草提取物中
分离紫外吸收与非紫外吸收成分
Pure 应用
猫爪草是一种热带藤本植物，是科学研究的一种宝贵的药物资源。活性成分为生物碱，丹丁酸和其它可能有促进免疫系统功能潜力的植物素。其中，生物碱有降压药的效果，可降低胆固醇，除此之外，还具有消炎、抗氧化和抗癌等特性。
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方法
萃取条件 | ||
萃取类型 | 研磨 | |
重量 | 2g | |
萃取溶剂 | 乙醚 | |
溶剂体积 | 20ml | |
超声波提取 | 30min | |
Flash 色谱条件 | ||
FlashPure EcoFlex 12g Sclia | ||
流速 | 25ml/min | |
UV1 波长 | 254nm | |
UV2 波长 | 280nm | |
溶剂 A | 正己烷 | |
溶剂 B | 乙酸乙酯 | |
进样模式 | 液体 | |
ELSD 载体 | 空气 | |
柱平衡时间 | 5min | |
洗脱方法 | ||||
步骤 | 1 | 2 | 3 | 4 |
时间（min） | 0.0 | 3.0 | 3.0 | 4.0 |
%B | 30 | 30 | 100 | 100 |
▲ 图 1. 在装有 12g Sclia 填料的 FlashPure EcoFlex 柱上对猫爪草进行纯化。色谱图说明使用紫外检测器和蒸发光散射检测器检测峰的诸多优点。
通过调整流动相的梯度对方法进行优化以期获得更好的分离效果，方法如下：
洗脱方法 | ||||
步骤 | 1 | 2 | 3 | 4 |
时间（min） | 0.0 | 3.0 | 9.0 | 1.0 |
%B | 30 | 30 | 100 | 100 |
▲ 图 2. 优化后的方法使得整体分离度大大提高，在 ELSD 检测器的加持下，可以有效检测到无紫外吸收的目标产物。
使用分析型 HPLC 将两组实验与初始粗提物进行分析对照，结果如下：
▲ 图 3. 通过对照发现只用 UV 检测器对样品进行纯化，不能检测非发色团的产物，导致馏分纯度不高。使用 ELSD 检测器收集的馏分可分离出高回收率和高纯度的组分。
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结论
天然产物在新药物研发中发挥重要的作用。粗提物通常含有活性良好的先导化合物，因此分离和纯化时需要很多步骤且充满未知性。Pure 系统收集包括 UV 检测器和 ELSD 检测器在内的多个检测器的信号，克服了使用传统 Flash 色谱方法遇到的纯化瓶颈，大大提高目标产物的纯度和回收率。化学家可以在双检测器以及 Navigator 技术的帮助下，有效地从粗提取物中分离目标化合物和含量低的成分，节省时间和人力成本。
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参考
Cat's Claw; Technical Literature, Raintree Nutrition, Carson City, Nevada.
Medicinal natural products; a biosynthetic approach, 3rd edition; Dewick, P.; John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey, 2009.
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